伯優(yōu) ? Probe qPCR Master Mix 是為使用 Taqman、MGB 探針和多重 PCR 而研制的。其由 BesTaq DNA 熱啟動(dòng)酶、dNTPs、Mg2+ 以及相關(guān)緩沖液組成,只需加入引物、探針、模板和無(wú)菌水即可進(jìn)行 qPCR 反應(yīng)。
1、特異性高:采用熱啟動(dòng)酶可抑制非特異性反應(yīng),并保證多重反應(yīng)的靈敏性。
2、靈敏度好:可精確定量低至 10 拷貝的模板。
3、線性范圍廣:可精確定量 9 個(gè)數(shù)量級(jí)。
4、通用性好:cDNA、gDNA、質(zhì)粒 DNA、病毒 DNA 均可作為模板,并兼容所有的熒光 PCR 儀。
5、使用方便:實(shí)驗(yàn)過(guò)程無(wú)需冰上操作。
儲(chǔ)存條件
-20℃保存 12 個(gè)月,使用前充分溶解混勻。
短期使用可放 4℃保存,避免反復(fù)凍融。
注意事項(xiàng)
1. 本制品不含內(nèi)參 ROX 染料。
2. 請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作,以防影響人體健康。
使用方法
1. 反應(yīng)液配制
反應(yīng)液 成分 | 體積 | 終濃度 |
Probe qPCR Master Mix | 12.5μl | 1× |
正向引物(10μM) | 0.5μl | 200nM |
反向引物(10μM) | 0.5μl | 200nM |
探針(10μM) | 0.25μl | 100nM |
模板 * | 1-5μl | |
總計(jì) | 補(bǔ) ddH2 O 至 25μl |
*gDNA 的模板用量不超過(guò) 500ng,cDNA 不超過(guò) 50ng。
2. PCR 循環(huán)條件的設(shè)定
步驟 | 溫度 | 時(shí)間 | 循環(huán)數(shù) | |
1 | 預(yù)變性 | 95℃ | 5min | 1 cycle |
2 | 變性 | 95℃ | 10s | 40 cycles |
3 | 退火、延伸 | 60℃ | 45s | |
步驟 3 收集熒光信號(hào) |
3. 實(shí)驗(yàn)結(jié)果分析
根據(jù)擴(kuò)增曲線的結(jié)果進(jìn)行熒光定量 PCR 數(shù)據(jù)分析。
貨號(hào) | 產(chǎn)品 | 規(guī)格 |
21603 | 伯優(yōu) ? 2x Probe qPCR Master Mix | 1mL |
5mL | ||
2x5mL | ||
10x5mL | ||
21604 | 伯優(yōu) ? 2x HS Probe qPCR Master Mix | 1mL |
5mL | ||
2x5mL | ||
10x5mL |